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実験日記

1 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/07(月) 13:18

しがない理系の学部4年生。
慣れない手付きで実験に明け暮れる日々をここに綴ろう。

2 名前： 夢見る名無しさん 投稿日： 2001/05/07(月) 13:58

先生が出張中だから、研究室の人ほとんど帰っちゃった
ゴールデンウィーク継続中。
まだ5月だから、尻に火がついてないもんなぁ。

これから回路つくらなきゃ。
なかなか目的の波形がでてこない。助けて

3 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/07(月) 21:41

ふぅ、疲れた疲れた。
さっき帰ってきたよ。
続きは御飯を食べてから・・・

4 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/08(火) 01:44

010507
１
GW前にやっていたサザンハイブリダイゼイションの続きをした。
メンブレンに転写するところまでやっていたので、今日はプローブを
ハイブリさせた。といってもただ単にメンブレンをバッファーと一緒に
密封してひたすら振盪するのみ。大した仕事じゃないなぁ。
今もラボでインキュベーション中なはず。
明日に続く。

5 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/08(火) 01:44

２
1月にMさんが取ったmRNAを使わせてもらってcDNAを作った。
初めてのRNAを使った実験。ちょっと緊張したな。
使ったプライマーは2種類。


３
逆転写後、２のcDNAをPCRにかけた。
テンプレートとしてtotalDNAも使った。
さらにプライマーの組合わせを5種類にしたので
ﾃﾑﾌﾟﾚｰﾄ3種×ﾌﾟﾗｲﾏｰ5種 → 15の系を作った。
ピペット操作にまだ慣れてないもんで時間かかったよ。

6 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/08(火) 01:48

>>2
やぁ、工学系の人だね。お互いがむばろう！ヽ(´∀｀　)


ああ、もうこんな時間だ・・・
明日早いのに・・・
寝る。

7 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/09(水) 14:30

論文の読み合わせの予習で徹夜・・・
下手したら今日も徹夜かも・・・

8 名前： 夢見る名無しさん 投稿日： 2001/05/10(木) 20:16

9 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/11(金) 00:12

昨日も3時間しか寝てない。
今日もこれから予習だよ・・・
実験もたくさんやってるんだけどちゃんと書く時間がない。
土曜日にでも書くね。


「今日の一句」

今週は　昼間実験　夜予習
　いったいいつに　寝ろっちゅうねん！

10 名前： し 投稿日： 2001/05/11(金) 01:19

>>1
>>1
>>1
>>1
>>1
>>1
>>1

壺飛び職人

11 名前： し 投稿日： 2001/05/11(金) 01:50

>>1
>>1
>>1
>>1
>>1
>>1
>>1

壺飛び職人

12 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/11(金) 16:26

昨日はあげ荒らしがあったのかな？
434までさがっているのでage。


今夜、大腸菌にプラスミドを組み込む予定。
それまでちょっと休憩。

13 名前： 夢見る名無しさん 投稿日： 2001/05/11(金) 16:37

.

14 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/12(土) 10:44

昨日はやっとまともに寝れたよ。
爽快爽快！

今から大腸菌のトランスフォーメーションが
うまくいってるかどうかを見に逝こう。

15 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/13(日) 03:02

このスレの存在すっかり忘れてたよ・・・
きょうはもう寝る。

16 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/17(木) 20:44

下がるの早いな…
人が増えたか？

17 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/17(木) 21:03

010508
１
サザンの続き。インキュベートしたメンブレンを洗ってくっつかなかったプローブを
洗い流す。それからプローブにくっつく抗体を入れてまたインキュベーション。
んでまた洗浄してパックしてX線フィルムに撮影。暗室の中で撮影するんだけど
暗くて作業しにくい。何故上司があんなにはやく目が慣れるのか不思議だ。

撮影はうまく行かなかった。どうもフィルムに感光させてる時間が短かったようだ。
しょうがないのでovernightで感光させることにした。


２
>>5のPCR産物を電気泳動したところ、あるプライマーの組合わせでバンドが見られた。
そこで、そのプライマーの組合わせで系をもっと大きくしてPCR・電気泳動をし、バンドが
また見られたら切りだし精製をすることにした。

20μl×3本×ﾃﾝﾌﾟﾚｰﾄ2種で計6本立てでPCRを行った。その後電気泳動をしたが、
片方のﾃﾝﾌﾟﾚｰﾄDNAのPCR産物からはバンドが得られなかった。仕方ないので
バンドが出た方だけを切り出し、精製、シークエンスと続けることにした。とりあえず
今日は切り出したゲルを破砕し、フェノールで懸濁、冷凍、までやっておいた。

18 名前： 上 投稿日： 2001/05/17(木) 22:10

　　　　　　＿　, ― ､
　 　 　　,−'　　｀　 　　 ￣ヽ_
　 　 　,'　　　　　　　　　　　 ヽ
　　　　(　　　　　　　　　　　　 ）
　　　 （ 　　ノ｀ｰ'ｰ'ヽ　　　　　）　　／￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣
　　　　（ 　 ﾉ●。　●（　　　　)　＜　ｱﾌﾛﾋﾟｶ・・・荒れキャラ
　　　　｀ｰ'(〇　o　 〇 )( 　　 ）　　|　最近、腹出てきたな。
　　　　　＿/　　　　　　 | ｀ー'　　　 ＼
　　　　（＿　　　　　 |_/　|　　　　　　　　￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣

19 名前： 下 投稿日： 2001/05/17(木) 22:11

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　　　　（ 　 ﾉ●。　●（　　　　)　＜　ｱﾌﾛﾋﾟｶ・・・荒れキャラ
　　　　｀ｰ'(〇　o　 〇 )( 　　 ）　　|　最近、腹出てきたな。
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20 名前： ぎむの(´ー｀)y-~~ 投稿日： 2001/05/18(金) 02:03

010509
１
昨日感光させといたサザンの現像。今日は僕がやった。もちろん後ろで上司が
見てるけど。結果は・・・　バンド出てないし・・・　メンブレン自体は長持ちするらしいので
とりあえず、平行してやってるシークエンスをやってからまたプローブを変えたりして
やり直すことにした。


２
>>17とまったく同じ条件でもう1回PCRをやった。ただし、今回は5本立て×2にして
系を大きめに取った。結果は成功！ バンドでました♪ というわけで、これもバンドを
切り出して>>17のサンプルと一緒にDNAの精製をすることにした。


３
nest-PCRをやった。これは近い部位のプライマーを用いて2回PCRを行う事により
非特異的配列の増幅を防ぐをいうもの。

本当は今日1回目しかやらない予定だったけど、実験台を片付け終わって
さあ帰ろうとしていたところで「気が変わった」と上司がいきなり言い出して
2回目もやることとなった。

2回目をやってる時、上司はかなり急いでいた。なんでだろうと時計を見ると
上司行き付けのスーパーの安売りタイムが迫っていた。う〜む、どうりで・・・